VARIACIÓN DE EXTRACCIÓN DE ADN USANDO DIFERENTES ALCOHOLES

GUTIERREZ, Romina y TERSOGLIO, Sofía

SUMMARY

The present communication reports the successful extraction of genomic DNA from vegetables

starting from different alcohols to determine which is the most suitable for extraction.

RESUMEN

El presente reporte informa sobre la extracción exitosa de ADN genómico de vegetales a partir

de diferentes alcoholes y así determinar cuál es el más adecuado para su extracción.

KEY WORDS: DNA, Etanol, Metanol y Propanol.

INTRODUCCIÓN

La obtención de ácido desoxirribonucleico (ADN), es el punto de partida para la mayoría de análisis genéticos; incluso contando con pequeñas cantidades de ADN, debido a esto en el presente reporte se analizar la manera con más eficacia de extraer ADN en cebollas, bananas y tomates, que luego podrá ser utilizado para identificar la membrana celular, enlaces, entre otros, aunque no será en su estado puro debido a que este presentara pequeños fragmentos de ARN.

Esta práctica requiere de varias etapas básicas. En primer lugar tiene que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula y luego  la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que se precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interface entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa. La sal evita la unión de las proteínas al ADN.                                                                   

El alcohol etílico o etanol es un tipo de alcohol primario, que se lo utiliza como un antiséptico que ejerce su acción desnaturalizando proteínas. Se caracteriza por ser volátil. Por tanto, su sustantividad es escasa y con su uso prolongado tiende a dañar los materiales. Mientras que el alcohol propílico o propanol es un alcohol secundario de tipo desinfectante (antiséptico), incoloro, muy miscible en agua, tóxico e inflamable. A diferencia del alcohol etílico, no destruye el material de los objetos por lo que se lo puede utilizar sin restricción.El alcohol metílico es un líquido incoloro, transparente, volátil, con aroma y sabor semejantes a los del etanol. Es bastante inflamable y posee propiedades desinfectantes y antisépticas.

HIPÓTESIS

En el proceso de extracción de ADN en vegetales el alcohol etílico va a ser el más efectivo ya que este desnaturaliza proteínas, aunque como daña los materiales es posible que resulte similar al alcohol propílico ya que este último no lo hace. El proceso se producirá en la cebolla con más facilidad porque el material genético que se encuentra en el núcleo es más sencillo de romper que en las demás.

MATERIALES Y MÉTODOS

Se morteriza la cebolla, junto con una pizca de sal y 5ml de agua fría. Luego se cierne la mezcla sobre un vaso de precipitados y se le agrega 30ml de detergente, el cual va a romper las membranas plasmáticas restantes junto con los restos de membrana nuclear, permitiendo mayor obtención de material genético, y se mezcla. Después de haberlo dejado reposar, verter el resultado en un tubo de ensayo y agregar el doble de alcohol por las paredes del tubo hasta que se formen dos capas. Se elevará al alcohol y observara un material blanco lo cual es acumulación de fibras de ADN. Extraer cuidadosamente con una pinza las fibrasy analizarlas. Este procedimientose repite en otros tubos, par los demás alcoholes y con los demás vegetales.

RESULTADOS

	ETÍLICO	METÍLICO	PROPÍLICO
CEBOLLA	1cm	0.7cm	0.4cm
BANANA	0.3cm	0.2cm	0cm
TOMATE	0.8cm	0.6cm	0.3cm

CONCLUSIÓN

Al finalizar el proceso se evidencia que el alcohol más atinado fue el etílico, ya que tiene la capacidad de desnaturalizar proteínas y facilitó la observación del ADN produciendo mayores cantidades de este. El segundo más eficiente fue el metílico seguido del propílico.

Con respecto a los vegetales la de mayor producción fue la cebolla seguido el tomate y por último la banana esto fue debido a la dificultad para romper la pared nuclear, ya que la cebolla posee pocos contaminantes extracelulares, es decir menos organelas y gránulos, como por ejemplo el de caroteno en el tomate y el de almidón en la banana.

BIBLIOGRAFÍA

http://www.cicloanatomia.com/extraccion-adn-celulas-vegetales/

https://www.monografias.com/trabajos91/informe-experimento-extraccion-adn/informe-experimento-extraccion-adn.shtml